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液相色譜分析中,氣泡問題如何解決?

2023-02-09

相信很多小伙伴和我一樣,在用液相色譜時(shí)會遇到儀器、管路等存在氣泡問題,這些小氣泡會影響實(shí)驗(yàn)過程的順利程度及結(jié)果的可靠性,以下整理了幾種出現(xiàn)氣泡的情況以及對應(yīng)的解決方法,大家如果遇到了,可參考對應(yīng)著解決。

1. 溶劑混合產(chǎn)生氣泡

這種情況比較多見,特別是配置流動相時(shí),兩種或多種溶劑混合,會導(dǎo)致液體熱力學(xué)體積的變化,易產(chǎn)生氣泡,這種氣泡通常比較明顯,有些還會掛在瓶壁或管壁上,晃一下可以看到有許多小氣泡存在液體中。

解決方案:

對溶劑過濾,超聲脫氣,或者儀器上加裝在線脫氣機(jī),或者充氮脫氣,同時(shí)保持室內(nèi)恒溫。

2. 泵排氣或吸液時(shí)

產(chǎn)生不間斷小氣泡

這種情況有可能是過濾頭被污染或部分堵塞,導(dǎo)致泵的吸力不均出現(xiàn)氣泡。

解決方案:

根據(jù)過濾頭的材質(zhì)選擇合適的處理方式,不可超聲的可用10%的稀硝酸溶液浸泡后,用純水清洗掉酸的殘留;可超聲的直接超聲處理就可以了,必要時(shí)需更換新的濾頭。

3. 泵壓力波動

泵壓力非正常波動時(shí)要注意,如果非管路氣泡所致,就要考慮是否是單向閥或泵內(nèi)部原因造成。

解決方案:

拆下泵頭,用甲醇或異丙醇超聲清洗單向閥、密封圈和泵頭整體,用酒精棉花擦拭柱塞桿,必要時(shí)更換密封圈、單向閥、柱塞桿等。

4. 進(jìn)樣時(shí)進(jìn)氣泡

進(jìn)樣時(shí)帶入氣泡,或者進(jìn)樣針中帶入氣泡。

解決方案:

多次沖洗進(jìn)樣針,在進(jìn)樣前,注意排除進(jìn)樣針里的氣泡。

5. 色譜柱進(jìn)氣泡

解決方案:

這種情況氣泡比較難排,可嘗試用純甲醇小流速長時(shí)間沖洗反相色譜柱,隨后逐步加大流速直至1mL/min,直至色譜柱壓力平穩(wěn)?;蛘吒鼡Q色譜柱。

6. 流通池積存氣泡

如果流通池積存氣泡,會對基線噪音造成較大影響,基線會很亂。

解決方案:

在不接色譜柱的前提下,可采用突然增大流量的方法來除氣泡;或者啟動輸液泵的同時(shí),用手緊壓住廢液管出液端,使池內(nèi)增壓,然后放開,反復(fù)操作數(shù)次,可去除流通池內(nèi)的氣泡。操作過程中需要觀察吸光度值的變化,如果變化劇烈,說明流通池內(nèi)有氣泡未排出,待數(shù)值基本不變時(shí),說明排氣泡成功,再觀察基線是否趨于平穩(wěn)。需要注意的是,增壓的時(shí)候不要增加太多,以免造成流通池破裂。

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