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蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物殘留量測(cè)定

2023-01-11

大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素是利用放線桿菌或小單孢菌生產(chǎn)的具有大環(huán)內(nèi)酯的抗生素的總稱(chēng),是由二個(gè)糖基與一個(gè)巨大內(nèi)酯結(jié)合而成的,它對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、支原體、衣原體有較強(qiáng)的抑制能力,屬一種中譜抗生素,按其大環(huán)結(jié)構(gòu)含碳的不同,可分為14元、15元和16元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素。近年來(lái),作為動(dòng)物飼料添加劑的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素已成為世界范圍內(nèi)需求量和銷(xiāo)售速度增長(zhǎng)更快的抗生素之一,已占世界抗生素市場(chǎng)銷(xiāo)售總值的8.5%,此類(lèi)抗生素在全球飼料中的使用量?jī)H次于四環(huán)素類(lèi)抗生素。

自1952年發(fā)現(xiàn)紅霉素(EM)以來(lái),已連續(xù)有竹桃霉素(OM) 、螺旋霉素(SPM)、吉他霉素(KT)、羅紅霉素、麥迪霉素、交沙霉素( JM )、克拉霉素及的衍生物問(wèn)世,并出現(xiàn)動(dòng)物專(zhuān)用品種如泰樂(lè)菌素(TS )、替米考星(TLM)等。屬十四碳大環(huán)的有紅霉素、竹桃霉素;屬十六碳大環(huán)的有泰樂(lè)菌素、吉他霉素和螺旋霉素,替米考星是泰樂(lè)菌素的半合成化合物,相比于其他大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素有相似或更強(qiáng)的抗菌活性。

大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素經(jīng)口服后能很好地被吸收,廣泛分布于組織,特別是肝、肺、腎組織。細(xì)菌對(duì)此類(lèi)抗生素易產(chǎn)生耐藥性。動(dòng)物經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期喂食后,抗生素及其代謝物在動(dòng)物組織及器官內(nèi)蓄積,可造成前庭和耳蝸神經(jīng)的損害,導(dǎo)致眩暈和聽(tīng)力減退,重者造成肝腎的嚴(yán)重?fù)p害。如不能很好地控制殘留,會(huì)對(duì)人類(lèi)健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。因此我國(guó)制定了紅霉素,螺旋霉素,替米考星,泰樂(lè)菌素等7種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素的更大殘留量。

Masakazu Horie等采用0.2%偏磷酸-甲醇(60/40,V/V)提取,然后通過(guò)OASIS HLB進(jìn)行凈化:用甲醇水活化后,加入樣品,再用水淋洗,更后用甲醇洗脫,該方法在加標(biāo)0.2μg/g時(shí),樣品加標(biāo)回收率為70.4%~93.2%。

GB/T 23408-2009蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物殘留量測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法。

樣品溶液:稱(chēng)取蜂蜜5.00g,于50mL離心管中,加入15mL 0.1mol/L 碳酸鈉緩沖溶液,渦旋混勻1min。 

BRP固相萃取柱(60mg,3mL),用3mL甲醇,5mL水活化;

提取液過(guò)柱,棄去;

用5mL水,5mL甲醇+水(2+8)淋洗,棄去,抽干;

5mL甲醇洗脫并收集。

洗脫液50 ℃氮吹至干,加入1mL甲醇+水(4+6),混勻,過(guò)0.22μm濾膜,上機(jī)。

蜂蜜本底

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10μg/L樣品加標(biāo)回收

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結(jié)論:

使用月旭Welchrom? BRP 60mg,3mL檢測(cè)蜂蜜中替米考星、螺旋霉素-I、竹桃霉素、紅霉素、羅紅霉素、泰樂(lè)菌素、交沙霉素回收率分別為86.5%、79.4%、87.2%、114.8%、91.5%、71.9%、71.7%,樣品回收率滿足要求。

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