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細節(jié)決定輸贏,流速決定成敗

2023-01-10

固相萃取柱(英文,簡稱SPE column,或Solid Phase extraction Cartridges,簡稱SPE cartridges)是從層析柱發(fā)展而來的一種用于萃取、分離、濃縮的樣品前處理裝置。主要應用于各種食品、農畜產品、環(huán)境樣品以及生物樣品中目標化合物的樣品前處理。固相萃取技術已經被廣泛地使用在許多國標(GB/T)以及行業(yè)分析標準中。

SPE技術基于液-固相色譜理論,采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進行富集、分離、凈化,是一種包括液相和固相物理萃取過程。利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過吸附劑,保留其中被測物質,再選用適當強度溶劑沖去雜質,然后用少量溶劑迅速洗脫被測物質,從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質,而讓被測物質流出;或同時吸附雜質和被測物質,再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質。

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SPE由于多種不可控原因影響,如填料選擇、樣品處理、過柱流速、洗脫溶劑等,都會導致實驗效果不佳或者實驗成本加大,在SPE的使用當中,每一步顯而易見的都離不開流速,特別是上樣、淋洗、洗脫等步驟控制流速尤為重要,但過柱流速卻往往被大多實驗人員忽略。

SPE的流速快慢不一,填料量、緊密度、溶劑極性又或者樣品粘度等因素都會影響流速的快慢。流速較慢會大大延長前處理時間,特別是大批樣品處理時,這會讓很多人苦惱不堪,這時可以選擇為固相萃取小柱增加負壓,從而加快流速,使時間成本大大降低。既然流速慢會影響時間成本,那么是不是越快越好呢?當然不是!這是很多人的誤區(qū),流速太快不利于目標化合物在填料上的保留,也會極大影響溶劑與目標化合物或者填料的相互作用,從而影響保留或者洗脫過程(可對比圖2、圖3)。可以在上樣、淋洗、洗脫等過程中適當降低流速,通常而言,流速低于5mL/min時結果較為穩(wěn)定,部分實驗可能需要更慢的流速。

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固相萃取柱是由重力自然滴落,加上批次可能存在一定差異,所以小柱的自然流速可能存在一定差異,會存在較快或較慢的情況,單靠小柱是無法控制的,這個時候就需要用到固相萃取裝置輔助,月旭固相萃取裝置,自帶調節(jié)閥及壓力泵口,輕松掌控流速,操作簡便,一次可上多個樣品,匹配通用轉接頭,適用于市面上大多SPE及免疫親和柱,前處理好幫手之名當仁不讓。

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