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玩轉(zhuǎn)免疫親和小柱

2022-09-23

霉菌毒素是由霉菌產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物,有較強(qiáng)的致癌性和降低免疫力作用。常見的霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素,嘔吐毒素、單端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠鐮刀菌素、伏馬菌毒素等。糧食及飼料很容易受到霉菌毒素的污染,這一問題越來越成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可忽視的重大難題。

月旭科技利用其強(qiáng)大的科研力量和先進(jìn)的生產(chǎn)工藝開發(fā)出了一系列霉菌毒素免疫親和柱產(chǎn)品,該系列產(chǎn)品通過了多次科學(xué)實(shí)驗(yàn)的檢驗(yàn),得到了多個(gè)官方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的認(rèn)證,并廣泛適用于各檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、進(jìn)出口機(jī)構(gòu)等。

01、組成結(jié)構(gòu)

一般一支完整的免疫親和柱由6部分組成:

? 柱管(1mL/3mL)

? 固定相(瓊脂糖凝膠)

? 抗體(瓊脂偶聯(lián)特異性抗體)

? 保護(hù)液(通常是緩沖溶液保持瓊脂潤(rùn)濕)

? 篩板以及上下頂蓋(防止柱液流失)

02、原理

免疫親和柱技術(shù)即免疫親和層析技術(shù),屬于樣品前處理過程中一種簡(jiǎn)化樣品提取過程,有效提高樣品純度的凈化技術(shù),由于其特異性強(qiáng)在食品分析中屬于痕量檢測(cè),檢測(cè)限非常低。Welchom?免疫親和柱用于從樣品中分離、純化真菌毒素,基于抗原與抗體之間的特異性反應(yīng)。免疫親和柱中的抗體通過共價(jià)鍵作用懸浮在凝膠中,特異性吸附樣品中的真菌毒素。如果供檢測(cè)的樣品中含有真菌毒素,樣品通過免疫親和柱時(shí),毒素被抗體捕捉結(jié)合。所有其他物質(zhì),被從免疫親和柱中清洗出去。甲醇作為洗脫液,將真菌毒素將抗體上洗脫。

03、使用方法

使用前先將親和柱恢復(fù)至室溫,放掉柱子的保護(hù)液,然后進(jìn)行上樣、淋洗、洗脫過程。

04、注意事項(xiàng)

1)上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;

2)樣品為復(fù)雜樣品時(shí)(如高蛋白、高油脂、酸性樣品),可將提取液分兩次提取樣品,提高提取效果;

3)樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,約每秒1-2滴;

4)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)的更佳溫度是在25℃左右,實(shí)驗(yàn)需要的環(huán)境溫度更好是室溫24℃-28℃,太高或太低的溫度都會(huì)對(duì)親和柱的回收率有一定的影響。親和柱在使用前需要恢復(fù)至室溫再進(jìn)行實(shí)驗(yàn);

5)親和柱不要在無水狀態(tài)下,瓊脂容易干燥萎縮,影響親和柱的質(zhì)量;

6)親和柱儲(chǔ)存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫,因?yàn)榫彌_液凍結(jié),會(huì)嚴(yán)重影響親和柱內(nèi)的物理結(jié)構(gòu),對(duì)親和柱的質(zhì)量影響很大;

7)洗脫一般選擇試劑甲醇,為增強(qiáng)洗脫效果可加大甲醇體積;

8)樣液免疫親和柱凈化后,洗脫液過0.45μm或更小孔徑濾膜效果更好。

05、產(chǎn)品信息

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