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混合模式分離,選擇性有多獨(dú)特?

2022-06-24

混合模式色譜柱可被認(rèn)為是疏水性的離子交換劑——相對于親水性更強(qiáng)的用于傳統(tǒng)的IEC(離子交換色譜)色譜柱。常用的混合鍵合相有三種模式:反相/陰離子交換、反相/陽離子交換、反相/兩性物質(zhì)。結(jié)果是這類色譜柱同時(shí)表現(xiàn)出RPC(反相色譜)和IEC的行為。使用混合模式的起因是,與RPC或IEC柱相比,他們具有獨(dú)特的選擇性。


混合鍵合相的優(yōu)勢有:

1

高選擇性,可提供與反相及離子交換不同的選擇性;

2

流動相無需使用離子對試劑即可分離強(qiáng)極性物質(zhì);

3

可以同時(shí)分析分離不同類型的化合物(帶正電、負(fù)電和中性物質(zhì));

4

可直接進(jìn)行質(zhì)譜分析。

混合模式分離的保留行為能通過改變B%、pH、緩沖鹽或鹽的濃度控制。


月旭現(xiàn)有的混合模式色譜柱有:


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Ultimate? NH2/CN鍵合相,新柱的保存溶劑是正己烷-異丙醇。當(dāng)作為反相模式使用時(shí):做樣流動相中含有甲醇、乙腈、水等極性溶劑,活化方式如下:


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微信截圖_20220624141152.png

當(dāng)色譜柱使用一段時(shí)間后,出現(xiàn)壓力升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常情形時(shí),先用過渡流動相沖洗掉色譜柱中的緩沖鹽,再按照如下方式?jīng)_洗(建議反沖):

微信截圖_20220624141320.png

UltimateC18/SCX、Ultimate? SCX/C18鍵合相,新柱的保存溶劑是甲醇/水。活化方式如下:

微信截圖_20220624141358.png

當(dāng)色譜柱出現(xiàn)柱壓升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常后,先使用過渡流動相沖洗掉色譜柱中的緩沖鹽,再按照如下方式?jīng)_洗,其中,如果流動相中使用了離子對試劑,需先用50%甲醇沖洗后,再按照下表沖洗(建議反沖):

微信截圖_20220624141429.png

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