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大家好，高效液相色譜和其它常規(guī)分析儀器一樣，為了能讓高效液相色譜更好的工作、在實驗的時候得到可靠的數(shù)據(jù)，首先你要保養(yǎng)好它，使它處于一個健康的待機狀態(tài)，這樣你使用它進行檢測分析時就可以比較順利地獲得理想結(jié)果。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣還可以延長儀器使用壽命。

在日常使用維護中更重要的主要有三點：脫氣、過濾和沖洗。這三點屬于更常規(guī)操作要求，同時也是檢測分析中必不可少的流程。小編會分三期為大家講解，今天先帶大家了解下脫氣的具體原因和脫氣的具體方法。

流動相里存在氣泡是HPLC系統(tǒng)操作過程中常見的問題、氣泡會造成泵輸出的問題，也能造成檢測器的輸出結(jié)果中出現(xiàn)假的色諧峰。大多數(shù)的氣泡問題可以在使用流動相之前以脫氣的方法來消除。下面就是小編簡單總結(jié)了脫氣的主要目的：

1、防止由溶解（在液體中的）氣體量的變動引起的檢測不穩(wěn)程度 。

2、提高保留時間和色譜峰面積的重現(xiàn)性。

3、防止氣泡引起尖峰。

4、使基線穩(wěn)定，提高信噪比。

5、防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障，示差折射率檢測器：使折射率變化UV檢測器（200nm以下）：溶解氧氣有吸收，熒光檢測器：溶解氧氣有消光作用。

6、減少死體積。

7、防止填料氧化。

只要空氣在流動相里保持溶解，氣泡問題就很少會出現(xiàn)。原則上講人工配備的等度洗脫流動相般不需要脫氣就可以在實驗中使用，但是被氣體飽和的溶液也只需要非常小的壓力下降就能脫氣。比如當(dāng)流動相通過溶劑人口的在線過濾器，或者當(dāng)流動相進人壓力相對低的檢測器溶液池時。因為這個原因和為了能使一般的HPLC操作具有可靠性，我們強烈建議用于反相色譜的所有溶劑都必須經(jīng)過脫氣。脫氣對于正相HPLC來說不會產(chǎn)生很多問題，所以使用正相色譜時脫氣是可選的。需要除去的溶解在流動相里的氣體量根據(jù)HPLC泵的設(shè)計不同而不同，一些泵能夠承受大量溶解在流動相里的氣體而另外些泵則需要徹底脫氣才能達到可靠的操作效果。

1.抽真空脫氣法：此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體，用真空脫氣10-15分鐘可以除去60%-70%溶解在流動相的氣體。但是由于真空脫氣會使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實驗的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡單分析。

2.氦氣噴洗脫氣法：氦氣噴洗是除去流動相里的氣體更有效的技術(shù)，主要是利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa壓力下，以約60mL/min流速通入流動相儲液容器中10～15min，可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣，能排除接近80%-90%溶解的氣體。采用一個高效分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎全部氣體排除。

3.在線脫氣法：在線脫氣主要優(yōu)點是操作簡單，低故障，并非常有效。

4.加熱回流法：此法的脫氣效果較好。但是還是有一些不足，那就是在操作時要特別注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會丟失，混合流動相的比例會有變化。

5.超聲波脫氣法：實驗室更普遍的脫氣方法，主要操作就是將欲脫氣的流動相置于超聲波清洗器中，用超聲波震蕩時間不宜過長，避免溫度升高導(dǎo)致易揮發(fā)性成分的丟失，一般在5min之內(nèi)。但是相對于其他脫氣方法，優(yōu)點是容易操作，時間短。不足之處則是此法的脫氣效果相對較差。