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何首烏中黃曲霉毒素的檢測

2022-06-23

何首烏(學(xué)名:Fallopia multiflora (Thunb.) Harald.),又名多花蓼、紫烏藤、夜交藤等。是蓼科蓼族何首烏屬多年生纏繞藤本植物,塊根肥厚,長橢圓形,黑褐色。生山谷灌叢、山坡林下、溝邊石隙。產(chǎn)陜西南部、甘肅南部、華東、華中、華南、四川、云南及貴州。其塊根入藥,可安神、養(yǎng)血、活絡(luò),解毒(截瘧)、消癰;制首烏可補益精血、烏須發(fā)、強筋骨、補肝腎,是常見貴細中藥材。但是在存儲的過程中容易被真菌毒素污染,故需要對其檢測。藥典上尚未收載,基體干擾較大,月旭的免疫親和小柱能很好的凈化。


免疫親和柱:Welchrom? Aflatoxin B1、B2、G1、G2。

規(guī)格:3mL,15/pk。

前處理

稱取2g樣品于離心管中,加入10mL 70%甲醇水,渦旋2min,超聲15min,6000r/min離心5min,移取2mL+15mLPBS溶液,混勻,用玻璃濾紙過濾,備用。

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常規(guī)過柱、凈化方式

備用溶液全部通過免疫親和柱,速率1s/滴,10mL PBS淋洗,抽干,1mL甲醇浸泡1min,收集全部甲醇溶液,混勻,上機。

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常規(guī)的凈化方式,并不能洗脫所有雜質(zhì),而且這些雜質(zhì)會顯著影響黃曲霉B1、B2、G1、G2的出峰,且無法通過改變色譜條件來實現(xiàn)分離。

淋洗液添加吐溫20的凈化方式

備用溶液全部通過免疫親和柱,速率1s/滴,10mL吐溫20PBS淋洗,抽干,1mL甲醇浸泡1min,收集全部甲醇溶液,混勻,上機。

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上圖中為添加了1%、2%、4%、10%的吐溫20PBS淋洗液。從圖譜結(jié)果來看,4中添加量的吐溫20PBS溶液都同樣起到了顯著的凈化效果。如果用免疫親和柱法來檢測其他樣品基質(zhì)中的黃曲霉毒素時出現(xiàn)類似的干擾情況,也可以嘗試用不同濃度的吐溫20淋洗,以達到凈化的目的。

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