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反相離子對色譜法建立的注意事項(xiàng)（二）
反相離子對色譜法建立的注意事項(xiàng)（二）
2022-06-23
今天小編再給大家分享一些注意事項(xiàng)：
方法調(diào)整
有機(jī)相，pH值，進(jìn)樣量，柱溫等。
有機(jī)相
案例
色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate? XB C18（4.6×250，5μm）。
流動相：A相：磷酸鹽緩沖液（磷酸二氫鉀6.8g/L，磷酸調(diào)整pH=2.5）；
B相：甲醇/乙腈/四氫呋喃；
檢測器：280nm；
柱溫：30℃；
流速：1.0ml/min；
進(jìn)樣量：10μL；
樣品溶劑：A相；
樣品溶液：L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺用溶劑配置成濃度均為：0.2mg/mL。
B相：6%乙腈
B相：10%甲醇
B相：2.5%四氫呋喃
討論：在使用相似洗脫能力的有機(jī)相比例的情況下，同時(shí)檢測L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺4種物質(zhì)，常用的甲醇，乙腈，四氫呋喃三種有機(jī)溶劑具有不同的分離結(jié)果，可以根據(jù)表《溶劑的選擇性特征》進(jìn)行篩選。
pH值
討論：針對于易解離的物質(zhì)，不同的pH會導(dǎo)致物質(zhì)的解離程度不一樣，進(jìn)而引起保留時(shí)間的差異，反相離子對色譜法中需要物質(zhì)成為統(tǒng)一的解離狀態(tài)。
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